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Buffer瓶的制備方法和步驟
Buffer瓶的制備方法和步驟實際上是指緩沖液(Buffer Solution)的配制過程,并將其儲存在特定的容器中(如試劑瓶),以便后續實驗使用。
由于“Buffer瓶”這一表述可能指的是裝有緩沖液的容器,以下我將詳細介紹一種常見緩沖液——TBE(Tris/Borate/EDTA)電泳緩沖液的配制
方法和步驟,以及一般性的緩沖液儲存建議。
TBE電泳緩沖液的配制方法
一、準備工作
準備所需材料:Tris堿、硼酸、EDTA(通常使用EDTA二鈉鹽)、去離子水、容量瓶(如1L)、燒杯、磁力攪拌器(可選)、pH計(可選,但
TBE緩沖液通常不需要精確調節pH)。
清洗所有玻璃器皿,確保無雜質。
二、配制步驟
1 . 準確稱取組分:
Tris堿:54g
硼酸:27.5g
EDTA二鈉鹽(注意:EDTA二鈉鹽需要先用少量去離子水溶解,因為EDTA在水中的溶解度較低,且加入NaOH有助于溶解):3.72g(如果
使用EDTA二鈉鹽八水合物,則為2.92g)
2 . 溶解:
將稱好的Tris堿和硼酸加入燒杯中,加入約800mL的去離子水。
使用磁力攪拌器充分攪拌,直至完全溶解。
將EDTA溶液(如果之前單獨溶解)緩慢加入燒杯中,繼續攪拌至混合均勻。
3 . 定容:
將溶液轉移至容量瓶中,用去離子水清洗燒杯2次,將清洗液也一并移入容量瓶。
繼續加入去離子水,直至溶液體積達到容量瓶的刻度線。
輕輕搖晃容量瓶,使溶液混合均勻。
4 . 儲存:
將配制好的TBE緩沖液轉移至干凈的試劑瓶中,貼上標簽,注明名稱、濃度、配制日期等信息。
室溫保存,避免陽光直射。TBE緩沖液可以穩定儲存數月,但建議定期檢查是否有沉淀或變色。
三、一般性緩沖液儲存建議
1 . 溫度控制:根據緩沖液的性質,可能需要冷藏或室溫保存。遵循具體緩沖液的儲存要求。
2 . 定期檢查:定期檢查緩沖液是否有沉淀、變色或異味,這些都可能是變質的跡象。
3 . 無菌處理:對于需要無菌的緩沖液,應在無菌條件下配制和儲存,并加入適當的防腐劑以防止微生物污染。
4 . 避光保存:許多緩沖液對光敏感,應儲存在棕色或深色試劑瓶中,并置于陰涼處。
請注意,不同類型的緩沖液其配制方法和儲存條件可能有所不同,因此在實際操作時應參考具體的實驗指南或試劑說明書。